一、微生物实验紫外灯杀菌效果检查

紫外灯在使用过程中辐射强度会逐渐降低，影响其杀菌效果，故应该定期检查。紫外灯的杀菌有效波长是253.7nm，其强度可以用中心波长254nm的紫外线强度计测定。在没有紫外线强度计的情况下可以采用生物学替代。

生物学测试简要步骤如下：选用枯草芽孢杆菌ATCC 9372，制成106CFU/mL~108CFU/mL

浓度的菌悬液;选用经脱脂处理的0.5cm×1.0cm大小的布片或铝片，高压灭菌后用作载体;每个载体上滴一滴制备好的菌悬液，干燥后备用;将8个染菌载体放于无菌器皿中，置于紫外灯下1m~1.5m处，开启紫外灯照射，于0.5h、1h、1.5h和2h各取出2个染菌载体，分别投入盛有5mL缓冲蛋白胨水的洗脱液;系列稀释后进行平板计数;同法取8个染菌载体用做阳性对照，操作除不经紫外此昂照射外与试验组相同。

杀灭率

=(阳性对照回收菌数-试验组回收菌数)/阳性对照回收菌数×100%

当杀灭率大于99.9%时，认为紫外灯杀菌效果合格。
 

二、微生物实验无菌室空气质量检查

无菌室空气质量检查应按照采样计划，根据情况对处于空态、静态和正常运行的风险区，使用适当的仪器采集空气中微生物，测定并监控风险区空气的微生物污染。空气悬浮微生物的采样和计数方法多种多样，根据多需采样目的决定具体的采样方法和采样器。因采样器的采集效率不同，应慎重选择合适的方法和设备。采样器分为两类：被动式采样器，如落菌盘;主动式采样器，如过滤采样器、撞击采样器、冲击采样器等。

1、沉降法

落菌盘等被动式空气微生物采样器不能测量空气中的微生物的总数，而是测量空气中微生物在表面的沉降率。只要确定单位时间落菌盘上微生物的数量，再根据落菌盘的暴露面积与暴露时间之间的关系，即可大致计算出空气中微生物的数量。

面积小于30m2 的室内设一条对角线取3点，在其中心以及两端距墙1m处各取1点;面积大于30m2

的室内房间四面距墙1m和中央各放置一个平皿，高度为实验台高度。培养基平皿开盖暴露10min，然后盖上盖子倒放，培养48h，计数每个平皿上的菌落数。

日常监控时，可以设定可接受的菌落数限值。一般无菌室所有的取样平皿上的细菌总数应小于15个。空气质量良好的无菌室，通常么个平皿上生长的细菌不超过2个。

2、空气过滤法

空气采样除了自然沉降法外，还可以使用专门的主动式采样器。主动式采样器可以评估风险区空气微生物的特征。主动式采样器主要包括过滤采样器、撞击采样器、冲击采样器等。

撞击采样器可以分为狭缝式采样器、离心式采样器和针孔式采样器。狭缝式采样器由附加的真空抽气泵抽气，通过采样器的缝隙式平板，将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上，附着的活微生物粒子经过培养后形成菌落，予以计数。离心式采样器由于内部风机的高速旋转，气流从采样器前部吸入从后部流出，在离心机的作用下，空气中的活微生物粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上，经培养后形成菌落，予以计数。

过滤式空气采样器是最常用、最简单的空气采样器。过滤式采样器有采样头、滤器、流量计和抽气泵组成。